Пользовательского поиска

клеточная  культура  напоминала  культуру  стволовых  дифференцированных  эмбриональных  клеток, но  вскоре, после  2-3  пассажей, клетки  становились  уплотнёнными  и  морфологически  сходными  с  эпителиальными. Эта  линия  клеток  из  9-дневного  зародыша  овцы  была  обозначена  как  TNT4.

Чтобы  донорское  ядро  и  реципиентная  цитоплазма  находилась  на  сходных  стадиях  клеточного  цикла, останавливали  деление  культивируемых  клеток  TNT4  на  определённой  стадии  (GO)  и  ядра  этих  клеток  пересаживали  в  энуклеированные  яйцеклетки  (соответственно  на  стадии  метафазы  II). Реконструированные  эмбрионы  заключали  в  агар   и  трансплантировали  в  перевязанные  яйцеводы  овец. Через  шесть  дней  эмбрионы  вымывали  из  яйцеводов  промежуточных  реципиентов  и  исследовали под  микроскопом. Отбирали  те, которые  достигали  стадии  морулы  и  бластулы  и  пересаживали  их  в  матку  овцы – окончательного  реципиента, где  развитие  продолжалось  до  рождения. Родилось  пять  ягнят (самок), из  них  две  погибли  вскоре  после  рождения, третья  в  возрасте  десяти дней, а  две  оставшихся  нормально  развивались  и  достигли  8-9-месячного  возраста. Фенотипически  все  ягнята  были  сходны  с  породой  овец, от  которой  получали  исходную  линию  клеток  TNT4. Это  подтвердил  и  генетический  анализ.

Эта  работа, особенно  в  части  культуры  эмбриональных  клеток, - значительное  достижение  в  клонировании  млекопитающих, хотя  она  и  не  вызвала  особого  интереса, как  статья  того  же  Уилмута  с  соавторами, опубликованная  в  1997  году, где  сообщалось, что  в  результате  использования  донорского  ядра  клетки  молочной  железы  овцы  было  получено  клональное  животное – овца  по  кличке  Долли. Последняя  работа  методически  во  многом  повторяла  предыдущие  исследования  1996  года, но  в  ней  учёные  использовали  не  только  эмбриональные, но  ещё  и  фибробластоподобные  клетки  (фибропласты – клетки  соединительной  ткани)  плода  и  клетки  молочной  железы взрослой  овцы. Клетки  молочной  железы  получали  от  6-летней  овцы породы   Финн  Дорсет, находящейся  на  последнем  триместре  беременности. Все  три  типа  клеточных  культур  имели  одинаковое  число  хромосом – 54, как  обычно  у  овец. Эмбриональные  клетки 

Яндекс цитирования Rambler's Top100

Главная

Тригенерация

Новости энергетики