Пользовательского поиска

ниже, они  отказались  от  электрической  стимуляции  слияния  донорской  соматической  клетки  с  яйцеклеткой  и изобрели  такую  микропипетку, с  помощью  которой  можно  было  бы  безболезненно  извлекать ядро  из  соматической  клетки  и  трансплантировать  его  в  обезъядренную  клетку. Кроме  того, авторы  использовали  в  качестве  донорских  относительно  менее  дифференцированные  ядра  клеток, окружающих  ооцит.  Наконец, удалось,  как  бы  синхронизировать  процессы, протекающие  в  яйцеклетке  и  трансплантируемом  в  нём  ядре, что  позволило  обеспечить  естественные  ядерно-цитолазматические  взаимоотношения  между  ядром  и  цитоплазмой, поскольку  трансплантируемое  дифференцированное  в  определённом  направлении  ядро  и  цитоплазма  яйцеклетки  до  того  работали  как  бы  в  разных  режимах.

Авторы  использовали  для  трансплантации  ядра  клеток, окружающих  ооцит  (клеток  так  называемого  cumulus  oophorus), клеток  Сертоли  из  семенников  и  клеток, выделенных  из  мозга. Ядра, выделенные  из  соматических  клеток, инъецировали  в  энуклеированное  яйцо  с  помощью  микропипетки. Яйцо  активировали  к  развитию, поместив  в  специальный  раствор  (так  называемый  HEPES-CZB), свободный  от  кальция, и  добавляя  стронций  и  цитохалазин.Стронций  активировал  яйцо, а  кальций  подавлял  образование  полярных  телец. Эмбрионов  культивировали  до  стадии  2-8  клеток, морулы  или  бластулы, а  затем трансплантировали  в  матку  приёмной  матери, где  многие  из  них  имплантировались  и  некоторые  из   них  (15-16%)  продолжали  своё  развитие. Процент  выхода  рождённых  мышат  (их  извлекали  с  помощью  кесарева  сечения  на  18, 5-19-й  дни  беременности)  был, однако, низок – в  разных  сериях  экспериментов  от  2  до  2,8%. Молекулярные  исследования  доказали  принадлежность ядер  рождённых  мышат  к  клеткам  донора  соматических  клеток.Таким  образом, по  крайней  мере  в  некоторых  случаях  доказана  способность  ядер  соматических  клеток  обеспечивать  нормальное  развитие  млекопитающих.

 Тем не  менее,  работы  с  мышами, несмотря  на  их  непростую  судьбу, значительно  расширили  наши  представления  о  методологии  млекопитающих.

 

Яндекс цитирования Rambler's Top100

Главная

Тригенерация

Новости энергетики